小鼠品系选择：

DBA/1(DBA)小鼠或C57BL/6(B6)小鼠 1）7-8周龄 2）SPF条件 3）高脂饮食

推荐的佐剂和胶原

货号	佐剂		货号	胶原
7002	不完全佐剂IFA（DBA-只在加强免疫用）		20011	鸡II 型胶原，冻干（DBA 或B6）
7008	完全佐剂CFA,1mg/ml(DBA)		20012	鸡II 型胶原，2mg/ml（DBA 或B6）
7001	完全佐剂CFA,4mg/ml(DBA)		20021	牛II 型胶原，冻干（DBA）
7023	完全佐剂CFA,5mg/ml(DBA)		20022	牛II 型胶原，2mg/ml（DBA）

免疫程序（选择其中一种）
方案1：单次免疫（DBA小鼠）
0天：尾根部皮下注射胶原和完全佐剂（4mg/ml）配成的乳剂
0-28天：每7天对关节炎评分
28-56天：每2-3天关节炎评分，关节炎发病率90-100%
56天：实验结束
方案2：加强免疫
0天：尾根部皮下注射胶原和完全佐剂（1mg/ml,DBA 小鼠）或（完全佐剂（5mg/ml,B6小鼠）配成的乳剂
0-28天：每7天对关节炎评分
21天：尾根部皮下注射胶原和不完全佐剂（DBA 小鼠）或完全佐剂（5mg/ml,B6小鼠）配成的乳剂。
28-56天：每2-3天关节炎评分，关节炎发病率90-100%（DBA）, 50-70% (B6)
56天：实验结束
用分散机乳剂制备，（不要用2个注射器推送制备）

1. 准备好实验仪器（图1. 刀头, b.10ml管（3通栓塞），1ml注射器）
2. 锁上活塞
3. 置于冰上
4. 加入完全佐剂
5. 逐滴加入等体积的胶原溶液
6. 10000-30000rpm 混匀2min。混匀过程中，上下移动针筒。
7. 置于冰上5min。
8. 10000-30000rpm 混匀2min。混匀过程中，上下移动针筒。
9. 滴入水中检测乳剂混匀质量。
10. 注射器吸取乳剂

乳剂检测

注射：


a用注射器吸取乳剂（不要有气泡） b针头(25 or 27 gauge x 5/8)         c.固定小鼠装置

皮下免疫乳剂：

免疫后：






注意：一定不要腹腔或静脉免疫小鼠

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