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肖先生
北京
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101 人阅读发布时间:2026-10-14 11:46
双链RNA(dsRNA)抗体常被用于识别、研究两类动植物病毒:一类基因组本身就是dsRNA,另一类在复制阶段会生成dsRNA复制中间体。
J2抗dsRNA单克隆抗体是双链RNA检测领域的金标准。
J2最早只用于植物病毒研究。2006年Weber等人用J2证实——正链RNA病毒感染细胞后会大量生成双链RNA复制中间体。此后,该抗体广泛用于动植物病毒研究。
图1 J2抗体Fab片段与dsRNA结合(图源Bou-Nader et al.,2026)
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项目 |
参数 |
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克隆号 |
J2 |
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亚型 |
IgG2a kappa |
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产品类型 |
单抗 |
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货号·规格 |
10010200(200μg) |
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形态 |
冻干 |
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使用说明 |
10010200加入200μL无菌蒸馏水复溶; |
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注意事项 |
冻干会产生少量变性蛋白聚集体,容易造成IF/IHC高背景; |
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纯化方式 |
200μg:蛋白G亲和层析;500μg:蛋白A-琼脂糖亲和层析 |
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纯度 |
凝胶电泳纯化的IgG抗体,A280=1.47对应抗体浓度1 mg/mL |
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运输条件 |
室温 |
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储存 |
·可在-20 ℃或-70 ℃保存十年,禁止反复冻融;加入10mM NaN₃后可在4 ℃短期存放; |
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抗原识别特性 |
识别长度≥40 bp的dsRNA,识别不依赖靶标RNA的碱基序列及组成。 |
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适用实验 |
斑点印迹、dsRNA免疫印迹、免疫亲和层析、免疫电镜、ELISA、FCM、ICC、IHC |
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应用说明 |
·dsRNA免疫印迹前,核酸分离必须使用聚丙烯酰胺凝胶电泳; |
图2 J2适用实验(A-D)
A. 斑点印迹,J2可检测体外合成dsRNA、天然dsRNA(图源de Faria et al.,2023)
B. 免疫电镜,J2免疫金标记示踪TuMV感染本氏烟木质部导管,囊泡富集dsRNA黑点(图源Wan et al., 2015)
C. 免疫荧光,J2检测SINV感染细胞,dsRNA(红色);DAPI标记细胞核(蓝色)(图源Wan et al., 2015)
D. 免疫组化,J2标记感染了传染性软疣病毒的皮肤组织(棕褐色)(图源Thomsen et al., 2023)
1. 在培养细胞以及石蜡包埋组织切片中检测多种病毒产生的dsRNA复制中间体,包括丙型肝炎病毒、登革病毒、鼻病毒、基孔肯雅病毒、狂犬病毒、脊髓灰质炎病毒、猪瘟病毒、雀麦花叶病毒等;
2. 研究宿主抗病毒免疫应答的启动机制,解析病毒的免疫逃逸策略;
3. 对病毒核酸复制位点开展超微结构定位,解析病毒生命周期;
4. 辅助区分未知病原体属于病毒/细菌;
5. 检测体外合成mRNA制剂中的dsRNA杂质(基因治疗相关研究)。
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克隆号 |
J2(金标准型) |
K1(J2替代型) |
K2(IgM专用型) |
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规格·货号 |
200μg:10010200 |
200μg:10020200 |
5ml:10030005 |
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抗体亚型 |
IgG2a kappa |
IgM kappa |
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剂型 |
纯化抗体冻干粉 |
杂交瘤培养上清液体 |
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纯化 |
200μg:蛋白G亲和层析;500μg:蛋白A-琼脂糖亲和层析 |
蛋白A-琼脂糖亲和层析 |
未经过纯化 |
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浓度 |
复溶后1.00mg/ml |
未稀释杂交瘤上清,无明确蛋白浓度; |
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配方体系 |
复溶后为PBS缓冲液,无稳定剂、防腐剂 |
RPMI基础培养基+5%胎牛血清;无防腐剂 |
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注意事项 |
冻干会产生少量变性蛋白聚集体,容易造成IF/IHC高背景;复溶后高速离心,取上清使用 |
直接稀释使用;最佳工作稀释比例需通过梯度滴定确定 |
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抗体来源 |
雌性DBA/2小鼠腹腔免疫:50μgL-dsRNA+75μg甲基化牛血清白蛋白,完全弗氏佐剂乳化;多次加强免疫后,取脾细胞与Sp2/0-Agl4骨髓瘤细胞融合,筛选获得杂交瘤克隆 |
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抗原识别共性 |
识别长度≥40bp的双链RNA; |
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亲和力差异 |
对poly (I).poly (C)亲和力比天然dsRNA约低10倍 |
整体亲和力与J2接近;对poly(I).poly(C)亲和力显著高于J2,检测PolyI:C可选 |
高亲和力结合所有类型dsRNA |
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适用实验 |
斑点印迹、双链RNA免疫印迹、免疫亲和层析、ELISA、FCM、ICC、IHC、IF、免疫电镜 |
斑点印迹、双链RNA免疫印迹、免疫亲和层析、ELISA、FCM、ICC、IHC、IF |
支持夹心ELISA (dsRNA定量) |
本文涉及所有试剂仅用于科研体外实验,不得用于人或动物的诊断、治疗操作。
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