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抗双链RNA抗体 (anti dsRNA antibody10010200 10010500)
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    肖先生

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    北京

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    试剂、抗体、细胞库 / 细胞培养、技术服务、ELISA 试剂盒、原辅料包材、实验室仪器 / 设备、耗材、医疗器械、体外诊断

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试剂解析丨双链RNA检测金标准:抗双链RNA单克隆抗体J2

101 人阅读发布时间:2026-10-14 11:46

双链RNA(dsRNA)抗体常被用于识别、研究两类动植物病毒:一类基因组本身就是dsRNA,另一类在复制阶段会生成dsRNA复制中间体。

J2抗dsRNA单克隆抗体是双链RNA检测领域的金标准。

J2最早只用于植物病毒研究。2006年Weber等人用J2证实——正链RNA病毒感染细胞后会大量生成双链RNA复制中间体。此后,该抗体广泛用于动植物病毒研究。

新闻图片1 

图1 J2抗体Fab片段与dsRNA结合(图源Bou-Nader et al.,2026)

一、说明书速查

项目

参数

克隆号

J2

亚型

IgG2a kappa

产品类型

单抗

货号·规格

10010200(200μg)
10010500(500μg)

形态

冻干

使用说明

10010200加入200μL无菌蒸馏水复溶;
10010500加入500μL无菌蒸馏水复溶;
复溶后为浓度1 mg/mL的PBS缓冲液,无稳定剂、防腐剂。

注意事项

冻干会产生少量变性蛋白聚集体,容易造成IF/IHC高背景;
复溶后高速离心,取上清使用。

纯化方式

200μg:蛋白G亲和层析;500μg:蛋白A-琼脂糖亲和层析

纯度

凝胶电泳纯化的IgG抗体,A280=1.47对应抗体浓度1 mg/mL

运输条件

室温

储存

·可在-20 ℃或-70 ℃保存十年,禁止反复冻融;加入10mM NaN₃后可在4 ℃短期存放;
·复溶后:分装并在-20 ℃或-70 ℃冷冻保存

抗原识别特性

识别长度≥40 bp的dsRNA,识别不依赖靶标RNA的碱基序列及组成。

适用实验

斑点印迹、dsRNA免疫印迹、免疫亲和层析、免疫电镜、ELISA、FCM、ICC、IHC

应用说明

·dsRNA免疫印迹前,核酸分离必须使用聚丙烯酰胺凝胶电泳;
·用琼脂糖凝胶转膜后检测灵敏度会显著下降,需自行做梯度滴定确定最优工作浓度。

新闻图片2 

图2 J2适用实验(A-D)

A. 斑点印迹,J2可检测体外合成dsRNA、天然dsRNA(图源de Faria et al.,2023)

B. 免疫电镜,J2免疫金标记示踪TuMV感染本氏烟木质部导管,囊泡富集dsRNA黑点(图源Wan et al., 2015)

C. 免疫荧光,J2检测SINV感染细胞,dsRNA(红色);DAPI标记细胞核(蓝色)(图源Wan et al., 2015)

D. 免疫组化,J2标记感染了传染性软疣病毒的皮肤组织(棕褐色)(图源Thomsen et al., 2023)

二、应用方向

1. 在培养细胞以及石蜡包埋组织切片中检测多种病毒产生的dsRNA复制中间体,包括丙型肝炎病毒、登革病毒、鼻病毒、基孔肯雅病毒、狂犬病毒、脊髓灰质炎病毒、猪瘟病毒、雀麦花叶病毒等;

2. 研究宿主抗病毒免疫应答的启动机制,解析病毒的免疫逃逸策略;

3. 对病毒核酸复制位点开展超微结构定位,解析病毒生命周期;

4. 辅助区分未知病原体属于病毒/细菌;

5. 检测体外合成mRNA制剂中的dsRNA杂质(基因治疗相关研究)。

三、3款抗dsRNA抗体对比

克隆号

J2(金标准型)

K1(J2替代型)

K2(IgM专用型)

规格·货号

200μg:10010200
500μg:10010500

200μg:10020200
500μg:10020500

5ml:10030005
10ml:10030010

抗体亚型

IgG2a kappa

IgM kappa

剂型

纯化抗体冻干粉

杂交瘤培养上清液体

纯化

200μg:蛋白G亲和层析;500μg:蛋白A-琼脂糖亲和层析

蛋白A-琼脂糖亲和层析

未经过纯化

浓度

复溶后1.00mg/ml
(A280nm=1.47对应1mg/ml)

未稀释杂交瘤上清,无明确蛋白浓度;
夹心ELISA建议用PBS以1:2稀释

配方体系

复溶后为PBS缓冲液,无稳定剂、防腐剂

RPMI基础培养基+5%胎牛血清;无防腐剂

注意事项

冻干会产生少量变性蛋白聚集体,容易造成IF/IHC高背景;复溶后高速离心,取上清使用

直接稀释使用;最佳工作稀释比例需通过梯度滴定确定

抗体来源

雌性DBA/2小鼠腹腔免疫:50μgL-dsRNA+75μg甲基化牛血清白蛋白,完全弗氏佐剂乳化;多次加强免疫后,取脾细胞与Sp2/0-Agl4骨髓瘤细胞融合,筛选获得杂交瘤克隆

抗原识别共性

识别长度≥40bp的双链RNA;
识别不依赖靶标RNA的碱基序列及组成;
可识别所有被测天然dsRNA、poly(I)・poly(C)、poly(A)・poly(U)

亲和力差异

对poly (I).poly (C)亲和力比天然dsRNA约低10倍

整体亲和力与J2接近;对poly(I).poly(C)亲和力显著高于J2,检测PolyI:C可选

高亲和力结合所有类型dsRNA

适用实验

斑点印迹、双链RNA免疫印迹、免疫亲和层析、ELISA、FCM、ICC、IHC、IF、免疫电镜

斑点印迹、双链RNA免疫印迹、免疫亲和层析、ELISA、FCM、ICC、IHC、IF

支持夹心ELISA

(dsRNA定量)

 本文涉及所有试剂仅用于科研体外实验,不得用于人或动物的诊断、治疗操作。

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